为了验证百岁兰ABA合成基因WmNCED6和WmNCED9是否具有驱动衰老的功能。研究者通过在拟南芥（Col-0野生型背景）中过表达这两个基因（获得转基因株系WmNCED6-OE#1,2与WmNCED9-OE#1,2），检测第三、第四莲座叶的衰老表型，并利用太阳388vip下载PlantView230F调制叶绿素荧光活体成像系统检测光合效率（Fv/Fm）（图2）。结果显示：与野生型相比，所有过表达株系叶片均表现显著加速衰老——叶片大面积黄化萎蔫（视觉表型），同时其Fv/Fm比值（光合作用核心指标）急剧下降，平均值从野生型的0.78 ± 0.02降至0.53 ± 0.03（p < 0.01），表明叶绿素降解导致光合功能严重受损。

类似地，为验证百岁兰转录因子WmMYB111对衰老的调控作用，通过分析拟南芥野生型（Col-0）与过表达株系（WmMYB111-OE#1,2）第三、第四莲座叶的衰老表型及Fv/Fm比值（图3）。结果显示：过表达WmMYB111的转基因植株叶片显著延缓衰老——相较于野生型叶片明显黄化萎蔫，转基因株系叶片维持绿色状态更久，且其光合功能关键指标Fv/Fm比值显著高于对照组（数据基于多个生物学重复）。

为验证 WmABF1-1在百岁兰叶片衰老中的功能，采用TRV介导的基因沉默技术构建 WmABF1-1 敲低株系（TRV-WmABF1-1）与空载体对照（TRV-control），观测离体叶盘在20天内的衰老进程（图4）。结果显示：沉默WmABF1-1显著延缓衰老——TRV-control叶盘在第15天明显黄化萎蔫（黄化面积＞80%），而TRV-WmABF1-1叶盘至第20天仍保持＞60%绿色面积；同步进行的叶绿素荧光效率（Fv/Fm）测定进一步证实，TRV-control的Fv/Fm值从初始0.82±0.03持续降至第20天0.35±0.05（降幅57.3%），而沉默组同期仅降至0.68±0.04（降幅17.1%，P < 0.001）。该结果直接证明 WmABF1-1通过促进叶绿素降解与细胞解体程序正向调控衰老。

在ABA缺陷突变体aba1-5的衰老叶段中，通过瞬时表达ABA信号因子WmABF1-1和衰老抑制因子WmMYB111，分析第10天局部区域表型、光合效率（Fv/Fm）（图4）。结果表明：WmMYB111过表达能显著延缓衰老——处理区域叶片的黄化程度明显减轻，其Fv/Fm值显著高于对照组（达基部水平），直接证实WmMYB111具有抑制衰老程序执行的功能；而WmABF1-1过表达则加速衰老，导致Fv/Fm值下降，叶片萎蔫加剧。

另外，为明确WmMYB111转录因子对其靶基因启动子的激活能力，WmABF1-1对百岁兰衰老核心基因的调控功能，以及WmABF1-1与WmMYB111对百岁兰氮转运基因（WmNRT1.7a与WmNRT2.5）的调控机制。在本氏烟草叶片中进行双荧光素酶实验（图5）。利用太阳388vip下载PlantView植物活体成像系统检测发现：WmMYB111显著增强所有其靶基因启动子的活性；WmABF1-1对三类启动子均具有显著激活作用；WmMYB111显著激活所有氮转运基因启动子片段活性，WmABF1-1则强烈抑制氮转运基因上述启动子。

以上结果证明过表达WmNCED6/9可通过促进ABA合成，在模式植物中直接触发早衰，不仅验证了二者在百岁兰叶尖衰老中的核心作用，也为"ABA积累→衰老执行"通路提供了跨物种功能证据。

WmMYB111作为衰老负调控因子，能够有效抑制叶绿素降解并维持光合机构完整性，从而延迟衰老进程，同时也揭示其作为ABA通路下游的核心衰老负调控因子，通过独立于ABA的方式维持光合功能与营养滞留。